
食品科学 现代农业科技2014 年第 1期 蔬菜中农药残留快速检测技术操作流程及注意事项 石 丹丹 (辽宁省辽阳市农产品质量监测检验中心 , 辽宁辽 阳 111000) 摘要 介绍了蔬菜中有机磷和氨基 甲酸酯类农 药残留的检测原理 , 详细概述 了具体操作流程 , 分析了在快速检测过程 中易出现的问 题 , 并提 出相应的对策, 以加快蔬菜农药残留快速检测方法的推广应用。 关键词蔬菜; 农药残 留; 快速检测技术; 原理 ; 操作流程 ; 注意事项 中图分 类 号TS207. 53 文 献标 识码A 文章 编号1007— 5739 (2014) 01— 0306一 Ol 农药残留的快速检测是把好蔬菜质量安全关的手段...
食品科学 现代农业科技2014 年第 1期 蔬菜中农药残留快速检测技术操作流程及注意事项 石 丹丹 (辽宁省辽阳市农产品质量监测检验中心 , 辽宁辽 阳 111000) 摘要 介绍了蔬菜中有机磷和氨基 甲酸酯类农 药残留的检测原理 , 详细概述 了具体操作流程 , 分析了在快速检测过程 中易出现的问 题 , 并提 出相应的对策, 以加快蔬菜农药残留快速检测方法的推广应用。 关键词蔬菜; 农药残 留; 快速检测技术; 原理 ; 操作流程 ; 注意事项 中图分 类 号TS207. 53 文 献标 识码A 文章 编号1007 5739 (2014) 01 0306一 Ol 农药残留的快速检测是把好蔬菜质量安全关的手段之 一,201 2 年全国各地《 基层农技推广体系建设项 目》 已经启 动 , 农药残留速测仪可以快速检测蔬菜中的农药残留 , 从而 能够有效地控制农药的使用量。 因此, 采用快速检测农药残 毒技术开展蔬菜质量安全全程跟踪是 目前切实可行的有效 措施l】 -4 ]。 1基 本原 理 根据有机磷和氨基 甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周 围神经系统 中乙酰胆碱酶的活性 , 造成神经传导介质乙酰 胆碱的积 累, 影响正常传导 , 使 昆虫中毒致死的机制 , 用于 对农药残留的检测 中。 如果蔬菜的提取液中不含有机磷或 氨基 甲酸酯类农药残留或残留量较低 , 酶的活性就不被抑 制 , 试验中加入的底物就 被酶水解或少部分被水解 , 水解 产物与加入的显色剂反应产生颜色。 反之 , 如果蔬菜的提取 液中含有一定量 的有机磷或氨基甲酸酯类农药 . 酶 的活性 就被抑制 , 试验 中加入 的底物就不能被酶水解 , 从 而不显 色或颜色变化很小 , 用分光光度计测定吸光值随时间的变 化 , 计算出抑制率, 就可以判断蔬菜中含有机磷或氨基 甲酸 类酯农药的残留情况 。 2操作 流 程 现以上海瑞鑫农药残毒速测仪为例 , 详细讲解农药残 留快速检测操作流程。 2. 1试 剂配 制 提取液 : 将 1 袋提取液粉倒入 500 mL 的玻璃瓶内 。 加 入 510 mL 的蒸馏水 , 摇匀后溶解备用。 酶 : 加入 3. 1 m L 的提 取液。 底物 : 每瓶底物粉加入 3. 1 mL 的蒸馏水。 2. 2空 白处 理 校正 : 仪器每天开机后 , 应进行 1次校正 。 “ 检测”确定 , 选择“校正” 。 校 0: 挡光块放入检测通道 , 盖好盖板 , 按“0” 透 光变为 0. 0 分批校正, 先校正 1~6 通道 , 取出再校正 7~ 1 2 通 道。 校 100: 校正好 0 以后 , 将挡光块取 出, 保证每个通道都 没有东西的情况下 , 盖好盖板, 按“ 100” , 使每个通道的透光 值显示在 1 00~ 1 范围即可 , 若按 1 次没有校正 到位 , 可以 再 按 1 次 。 2-3样 品处 理 取表面干净的蔬菜或瓜果 , 将样品切成 1 cmx1 cm大小 置于小烧杯内 , 用天平准确称取 1 g, 用移液管提取 5 mL 提 作者简介石 丹丹( 1982一) , 女 , 辽宁辽 阳人 , 农 艺师 , 从事农产品 质量 安全检 测技 术研究工作。 2013 12 12 收稿 日期取液浸泡 , 用震荡箱震荡 2~ 3 r ain 或者在常温下放置 10 min, 期间晃动烧杯多次 , 使蔬菜中的农药能充分溶入液体内。 用 移液管吸取上清液 2. 5 m L 移入比色皿 , 即为检液。 2. 4上 机测 定 在比色皿内加 0. 1 mL 酶液及 0. 1 mL 显色剂混匀后放 置 15 r ain, 然后立即加入 0. 1 mL 底物混匀 , 立即倒人比色皿 中放人通道 , 盖好盖板 , 按启动键开始检测 , 时间到后显示 结果 , 按“Y ”键保存结果并自动打印记录。 3注意事 项 3. 1提 前做 检测 空 白 每次检测样 品前都应对药品的活性和仪器 的性能给予 验证 , 做空 白试验就是体现这个过程 。 初始吸光度 A 1 的大 小一般在 0. 1~ 0. 3 , 3 r a in 后吸光度 A2 在 0. 6~ 0. 9 , 此 时显色 剂、 底物是最好的, 没有失效 。 若 A 1值超 过 0. 5, 若没有人为 操作失误 , 首先看显色剂是否颜色异常 , 然后考虑底物失效 的问题 。 A Ac=A2一 A 1 的值在 0. 3~ 0. 8 时, 说明酶没有失去活 性 , 可以使用; 通常应在 0. 5~ 0. 6(小于 0_3 的原 因: 一是酶 的 活性 不够, 二是温度太低 )。 3. 2操 作动 作快 速 加底物和 上机的过程要尽可能地快速 , 最好 2 人共 同 操作 。 酶分解底物 、 分解物 再与显 色剂结合 的过程是非常 快 , 如操作不熟练就会产生人为误差问 。 3-3放 置 时间和 温度 时间: 在标准方法 中规定的是 30 min, 由于药品质量的 改进 , 现在可以是 15~ 20 min(药品质量 的提高 , 反应时间缩 短) 。 样品放置时间与空白放置时间严格一致。 温度 : 37~ 38 ℃(恒温箱) 。 根据药品性质 , 25 ℃以上的室 温就可以, 实际上在温度超过 1 0 ℃以上即可操做 。 3. 4假 阴I生与假 阳性 问题 假阴性是因为某种农药对某种酶抑 制作用很小或无作 用而产生的 , 表现出无农药的假象。 假阳性是由于酶活性降 低或失活 , 导致底物不能被水解 , 无法与显色剂结合显色造 成的 , 其结果似乎与提取液 中有农药残留类似。 解 决办法 : 选择有较好活性 、 较强敏感性 的酶 。 3. 5检测结果异常情况的处理 若一组样品抑制率都是负值, 如果已加显色剂 , 则考虑 药品在冰箱存放时间较长 、 温度太低 的状态使用时经常产 生这种情况。 检测结果为 0. 00%的数据 , 大部分是一个假值 , 当抑制 ( 下转第 309 页)龙8技术支持龙8技术支持
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